牛磺熊去氧胆酸对谷丙转氨酶活性的影响- 新闻详情：
摘要：通过丙转氪酶(GPT)活力的方法，观察了牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)对GPT的作用发碰TUDUA对GPT呈抑耕作甩且随其浓度的增加，抑制作用增强．当TUDCA浓度为0．833mg／ml时，对GPT的抑制率达到81动力学实验还表明，增加底物浓度，并不能消除TUDCA对GPT晒力的抑制作用，K值不变，F’值作减小。【值增大，宴现出非竞争性抑制作用同时用CCI小鼠肝损伤模型，观察了口服TUDCA与UDCA对血清GPT活性的影响．提示TUDCA对肝脏无损害较UDCA为忧。】
关键词：牛磺熊击氧胆酸(TUDCA)；答丙转氯酶(GPT1f活性；
抑制牛磺熊去氧胆酸(Tauroursodexycholicacid、简称TUDCA)是一种结合型天然胆汁酸、广泛存在于人及动物胆汁中，熊科动物胆汁含量最高，是胆汁r镇静及抗噱厥作用的主要有效成分。为研究TUDCA的生理、药理效应，本实验观察了人工合成的TUDCA对血清谷雨转氨酶(GPT)活性的影响，并测定丁TUDCA对谷丙转氮酶动力学性质的影响同时，用CC1t造成小鼠肝损伤模型，观察丁TUDCA与熊去氧胆酸(UDCA)对小鼠血清各丙转氨酶活性的影响，以便为研制药用TUDCA提供有关理论依据。
1实验部分
1．1仪器与试剂
TUDCA由本室合成；GPT底物溶液(Ⅱ一酮戊二酸O．292mg／ml，dI一丙氮酸0．O178g／m1)；pH7．4，0．1mol／L磷酸缓冲液；2，4一二硝基苯肼溶液(0．198rag／mI)；0．4moj／LNaOH溶液；丙酮酸标准溶液(0．22mg／m1)；(以上五种溶液均按相应比例配置)GPT标准酶液由健康小鼠肝脏匀浆液上清稀释至320u／m1即得；恒温水浴；721分光光度计。
1．2标准谷雨转氨酶的制备和稳定性试验称取健康小鼠新鲜肝脏O．5g，加生理盐水l0m1用Tefeon玻璃匀浆器匀浆，后经3000r／min离心10Inin．取上清液用生理盐水稀释20倍即得。该酶液置冰箱4C保存，每隔ld测其活力一次，测定方法见文献[23。一周测定结果，该酶液酶活平均值为320土10u／ml，表明该酶于4℃放置一周活力不减失，稳定性良好。GPT活力单位定义：1ml小鼠肝匀浆液上清稀释液于37℃与底物作用30min，每产生2，5)lg丙酮酸为一个GPT活力单位。
I．3谷丙转氨酶标准曲线的绘制
取干燥洁净试管6只编号，分别加入丙酮酸标准溶液0，0．05，0．10，0．15，0．20，0．25m；加入相应GPT溶液1．00，O．95，0．85，0．75ml，各管再加入0．1mol／LpH7．4磷酸缓冲液0．20ml后测各管GPT活力，方法同1．2，以各管光密度与空白管光密度差值为纵座标，以GPT活力单位为横坐标作标准曲线，得回归方程。
1、4TUDCA浓度对谷丙转氯酶的作用
1．5TUDCA对谷雨转氨酶动力学的影响
1．5．1谷雨转氨酶反应动力学曲线于7支干燥洁净试管中分别加入GPT底物溶液0．O15，0．20，0．25，0．30，O．40，0．50ml，各管分别用pH7．4，0．1mol／L磷酸缓冲液补充至总体积为O．7mI，然后各管加入GPT标准酶液0．5ml，按文献方法测GPT活力。两次结果取平均值．另取7支试管做空白以吸光度倒数11A~2o为纵座标，以底物浓度倒数为横座标作图。
1．5．2TUDCA存在时谷雨转氨酶反应动力学曲线取7支干燥洁净试管，各加GPT底物溶液0，0．15，0．2O，0．25，0．30，0．40，0．50ml，用磷酸缓冲液补充至各管体积为0．5ml，各管再加0．625mg／ml的TUDCA溶液0．2ml和GPT标准酶液0．5ml，按文献测GPT活力。
1．6TUDCA砷CCIt引起的小鼠急性肝损伤的作用口J取小鼠4O只，雌雄各半．随机分为4组．分别po生理盐水(两组)+TUDCA100mg／kg，UDCA1D0mg／kg，连续7d，于d6按l0ml／kg灌以l：700的四氯化碳油溶液，制备急性肝损伤模型，其中一组以生理盐水替代CCI一作为正常对照组，20h后摘眼球取血，测血清GPT活力(高单位血清以生理盐水稀释5倍)。
2讨论
1)国内外关于TUDCA对谷丙转氨酶作用的研究未见报道，本研究发现TUDCA对体外谷丙转氨酶呈抑制作用，且随其浓度升高作用增强，当TUDCA浓度为0．833mg／ml时，对GPT活力的抑制率达8l％。至于该性质与熊科动物生理活动的相关性，有待进一步研究。
2)动力学实验表明．即使增加底物浓度，也不能消除TUDCA对谷丙转氨酶的抑制作用。此外．在TUDCA存在下，反应速度与底物浓度在Lineweaver—Burk曲线与正常酶促反应的Lineweaver—Burk曲线相比，值不变，值减小，值增大，呈现出非竞争性抑制作用。
3)对小鼠的整体试验表明，TUDCA组与生理盐水组无显著性差异，而UDCA组GPT活力较生理盐水组明显升高。表明TUDCA对肝脏无损害，较UDCA为优，至于TUDCA对小鼠肝细胞作用机理及UDCA对小鼠肝细胞是否有破坏作用，尚待进一步研究。
