去氧胆酸标准溶液的制备称取80毫克标堆去氧胆酸，用乙醇溶于100毫升容量瓶中，稀释至刻度。吸取10毫升，又以乙醇稀释到100毫升容量瓶中，最后每5毫升标准液中含去氧胆酸为0.4毫克。

胆汁中去氧胆酸样品溶液的制备称取胆汁0.5一1克，加25毫升水和25毫升30%的NaOH溶液，缓缓回流水解6小时，冷却，用浓HCI酸化到刚果红试纸变蓝，，冷却，用50毫升乙醚振摇提取，分出液层，反复用乙醚提取四次，合并醚层并浓缩至加毫升。用乙醇温热溶解并稀释到200毫升容量瓶中，混匀后又精确吸取20毫升，并以乙醇稀释到100毫升备用。

样品中去氧胆酸样品溶液的制备精确称取样品80毫克，用乙醇溶入100毫升容量瓶中，稀释到刻度，混匀。吸取10毫升，又以乙醇稀释到100容量瓶中，混匀备用。

去氧胆酸的含量测定分别精确吸取去氧胆酸标准液5毫升，样品溶液导毫升或胆汁的样品溶液4毫升于带塞试管中，在热水浴上蒸发除去乙醇，并在110℃烘箱内干燥15分钟，完全除去乙醇，放冷至室温。加3毫升试剂(1.。毫升水杨醛用稀IJ:504稀释到35毫升)，在40“C保持15分钟，并在室温放置5分钟后，精确加人冰醋酸20毫升，充分振摇10秒钟，并正确地掌握在加人醋酸后5分钟时，于680微米处比色，读取光密度。

加人冰醋酸后，要准确地掌握在5分钟后的比色，因此在同一时间，制备的试管总数不能超过5支(包括空白、标准品和样品)，以免影响读数。这方法应用于商品的去氧胆酸含量测定时，其重复性可达到士2.5%。